近日,中科院天津工业生物技术研究所与江苏大学、佐治亚大学合作,成功解析出糖苷水解酶第120家族的新型木糖苷酶和底物(木二糖)、产物(木糖)复合体的结构,该结构为糖苷水解酶第120家族首个解析的晶体结构。
此次解析的新型木糖苷酶是CAZy资料库中第120个水解酶家族的木糖苷酶(www.CAZy.org),以四聚体的型式存在。此次解析结果发现此木糖苷酶具有开放式的底物结合区,可水解较长链的底物。我所还进一步将相关的活性胺基酸依序进行了点突变并测试其活性,并推测出此木糖苷酶是利用D382和E405为催化胺基酸执行底物的催化,利用W113、Q289、K358、H360、W383和R450来辨认底物。
该研究为糖苷酶水解酶第120家族的研究和改造提供了坚实的基础,晶体结构的获得填补了GH120糖苷水解酶家族结构的空白;可以为分析催化活性区提供结构基础,以利于进一步阐明XylC的催化机理;同时可以为通过定点突变等方式改善酶的活性提供依据;对了解 XylC底物特异性及耐热性的分子机理奠定了基础。
研究成果已经被Biochemical Journal(448: 401-407)接收,该项目获得工业酶国家工程实验室、“863”项目(2012AA022200)及天津市专项(12ZCZDSY12500)的支持。
结构:红色部分(木二糖)为活性区,由两个结构域所构成,分别为β-helix结构域(黄色及浅蓝)和β-sandwich结构域(深蓝)